3D细胞培养生物反应器系统,用于生长和维持球状体和有机体的结构和功能体内细胞

在这个播客中,我们与Celvivo的首席研究官和联合创始人,Celvivo教授谈到了3D文化的重要性以及与3D中生长和维护文化相关的挑战。我们还使用3D培养生物反应器系统讨论,该系统采用Clostat技术来培养球状体和有机体,以维持结构和功能体内细胞。

显示说明:

如果他可以描述使用3D文化超过2D的优势,我就会询问Fey教授。他解释说,通过3D细胞文化,您获得的数据更加密切地反映了生物体中发生的事情。他描述了有一种细胞行为。在一个端子细胞上生长如疯狂,但没有时间表达他们处于伤口愈合模式的高级功能。在频谱的另一端,细胞生长非常缓慢但表达高级功能,在这里它们可以模拟组织。因为2D中的细胞用胰蛋白酶重复处理,所以它们在伤口愈合模式中持续。3D培养细胞不是,因此有机会模仿成人组织。

接下来,我让他讨论一些应用程序,在使用3D文化系统至关重要。他描述了3D用于测试候选药物,在那里您需要一个结果,这将反映将药物给患者的药物发生。另一个例子是理解组织如何工作,例如,干细胞如何划分和迁移通过组织以取代死亡的分化细胞。第三个例子将理解不同类型的细胞彼此相互作用。例如,酒精杀死肝细胞。如果细胞死过多,成纤维细胞试图修复组织并且这可以是建模的体外

我告诉他,我认为普遍认为3D文化优于2D,特别是在他提到的应用中,但许多人难以在3D系统中培养。他描述了一些在3D中培养的最大挑战。首先,细胞需要从胰蛋白酶损伤中恢复时间。对于许多细胞系,这意味着它们在达到代谢平衡和模拟组织之前需要2-3周。所以第一个挑战是耐心,让你的细胞有机会安定下来。您也必须避免感染。

第二个挑战是大小的事项。在样用组织中,3D中的细胞簇需要达到一定尺寸。这可能是由于群体内的氧气和营养梯度。因此,您的群集需要大于3-400 um直径,但这意味着不能使用显微镜或许多通常的微量辐射板测定,因此您必须工作好像您正在使用活组织检查。

然后我们讨论了Celvivo的3D生物反应器系统以及它的开发方式。他告诉我,发展系统很有趣。他们进入3D的原因之一是他们参与了南非的糖尿病研究。他们想保留收集的活检,但它们在文化中分开(技术上称为熔化冰淇淋效果)。他们已经看到并使用了另一个系统,但很难使用。所以他们自己设计了自己。它的合作伙伴合作,他们的合作者希望设备副本,只要他们开始生产设备并不断改善所使用的工程和材料。

然后我让他描述了尖刺宫如何解决3D文化中最紧迫的问题。他表示,最紧迫的问题是它必须容易,并且在您甚至可以开始实验之前必须保持3周的文化。新的螺旋条具有相机,因此可以观看群集,而无需将它们从培养箱中取出并扰乱文化。此外,您没有感染的风险。他继续说,他们也使得改变增长媒体很容易,分享只需要20秒。

他描述了,为了采样,很容易打开培养室并取出300件中的一两块进行分析,然后再次关闭它,让文化继续。他将它与主体生活的活检相比,您可以遵循任何对待治疗的反应。

我提到一些听众可能不熟悉这项技术,并要求他谈论博斯塔特技术。Fey博士解释说,通过螺旋状技术,通过不断旋转它,防止细胞在培养皿表面上沉降。结果,它们以有机体或球状体的形式发展为簇。他继续说,在大多数情况下,您不需要使用不同的媒体来使用3D,并且您不需要脚手架,Matrigel或生长因素。Celvivo发表了一组协议帮助客户开始使用Clinostat技术进行培养。

临床和临床反应器

我通过询问产品本身的特定组成部分以及它如何适合标准实验室。FEY教授分享了他们目前的系统由两部分组成。林斯塔尔,其中包括在一家合作中裹着的6个螺旋桨2孵化器和平板电脑运行调节瓣膜,温度和CO的速度的软件2水平。

还包括圆形一次性细胞培养瓶,一点像培养皿,你可以关闭,称为ClinoSectors。临床反应器含有自己的加湿,因此尖刺饼可以在没有湿度的情况下运行,这显着降低了感染的风险。尖刺宫还有一个内置UVC灯以杀死细菌。

他确实说,可以改变测定,但Celvivo发表了一个测定的集合已经测试过,与他们的系统很好地工作。它们的系统可以通过测量阴影区域来精确地测量簇中的细胞,DNA和蛋白质的量。这意味着在不使用任何材料的情况下易于标准化实验。

然后,我询问他是否可以使用尖裙来通过有机鞋的工作流程。他说,如果你正在使用细胞系,工作流程将像往常一样从经典的2D文化中生长并收集你的细胞。然后将细胞直接放入培养皿中,或者可以形成小块,然后将它们放入培养皿中并旋转它们。初级或干细胞可以相同的方式处理。媒体需要每隔第二天左右改变,但在2-3周的过程中,小块模拟组织形式,然后可以用于研究。如果您正在从活组织检查工作,那么细胞需要从活组织检查中分散,或者您可以生产非常小的碎片并从那里进行。这些通常更早运行,但它取决于您的系统以及您如何启动群集。

我询问他认为临床今天的影响最大。Fey教授说,对他来说最令人兴奋的事情是看到用于许多不同应用的产品。它正在药物发现中使用,测试药用植物提取物,表观生物和癌症研究,或用于糖尿病研究,该产品起源于此。其他人还在使用骨骼生长或薄脑衰老。它已被证明在许多不同的实验设置和每种情况下都非常有用,它正在为医学研究提供有价值的数据。

我通过询问是否还有其他人愿意为倾听者添加。他说他无法进入任何具体细节,但他确实说他们计划使产品更容易使用和更自动。他们还计划能够直接从文化中收集更多数据。

请拜访临床, 了解更多。

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