细胞系发展 - 看看这一关键过程步骤的演变,新进展和未来发展

在这次书面访谈中,Solentim首席商务人员Ian Taylor博士讨论了细胞系发展的演变,技术和工作流程的新进步,以及未来的进展。我们的讨论包括改进的成像技术,手动限制稀释与单细胞播种,以及实现克隆的过度。

细胞系发育和优化对于成功的生物制造至关重要。您能否告诉我们它如何发展,以及目前最期待在优化期间实现的公司?

回到20世纪80年代,它在很大程度上来自于南旧金山的Genentech的先驱者,他们具有工程杂志细胞系的理念,以产生重组治疗蛋白。细胞系发展继续发展,现在我们有许多CHO细胞系,主要来自于Genentech最初创建的Cho细胞系。

谈到优化时,感兴趣的蛋白质的高滴度是最重要的。目前这些天的基准测试约为10克/升。同样重要的是,可以对几千升的生物反应器进行缩放。第二优先级正在确保高蛋白质质量。

您认为当前的细胞系开发过程中最具挑战性的方面是什么?

有三个重要的范围。首先是教育研究人员,了解筛选数千克隆以发现“干草堆中的针”或最佳克隆是不必要的。拉出这些高价值克隆的诸如使用转座酶的比较有效的方法。第二个是让人们意识到早期看蛋白质生产力并且单细胞毫无意义。第三,许多单细胞不会生长,这些都可能是顶级克隆,但你不会知道它。使用补充剂确保您获得高度恢复,并且增长到殖民地的最大克隆数非常重要。

耦合成像的单个细胞播种是重要的进步。你能解释为什么这是为什么,并告诉我们更多关于Solentim的VIPS系统以及它如何消除FACS的需求?

从历史上看,客户需要两种仪器,一个用于单个细胞隔离,一个用于整体井成像。这两个步骤现在都组合成一个仪器,贵宾。VIPS系统还能够在干燥井下的液滴中确认单个电池,为克隆性呈现新的“微观”。这是我们热衷于进入监管机构的新应用。

如何使用VIPS系统影响细胞系开发工作流程?您可以使用VIPS为客户/合作伙伴共享一些影响的示例吗?

vips使单细胞板播种在非常高的播种效率下,80-95%,同时保持最大可存活率。与非随机积分方法(例如转座或降落垫结合)时,与通常使用的5,000个克隆相比,可以在<200克隆中完成完整的细胞系开发项目(参见应用笔记)。因此,与竞争对手相比,您可以减少平板的总数,他们可能运行多达100 x 96孔板,这是一个需要自动化的过程。另一个最近的一个重要例子是我们的客户Biotheus,他们已经向我们通知我们,他们已经达到了使用vips开发的细胞系调节者的成功展示结果。

我最近阅读了遗传工程新闻中的一项研究,其中VIPS系统与地平线发现的淘汰赛CHO K1线和来自SAL Scientific的Instagro Cho的组合用于优化细胞系发展。你能告诉我你的结果摘要吗?

我们从地平线中选择了HD-BIOP3细胞系,因为它是我们客户使用的主要商业细胞系之一。然而,它的过度可能是高度变化的。为了获得更一致和高质量的输出我们的研究经过测试的条件媒体,商业基础介质和Instagro Cho补充,以改善克隆的过度和一致性。这项研究可以通过我们详细介绍网络研讨会和我们的应用笔记

当您查看手动限制稀释(LD)与vips系统的播种时,您可以详细介绍您发现的内容吗?

在它的面对面上,单个细胞播种产生远比LD的远远超过井。通过使用整体井成像的更深入的分析来支持这一点,揭示了高比例的LD井实际上含有多个单元。因此,vips结果甚至更引人注目,因为你的播种程度为80-95%,你的单细胞有更多的井。这种改进是由詹森在他们的中阐明的网络研讨会案例分析。

我想扩展一些关于克隆遗传的重要性以及你在优化研究中发现的内容?

克隆的过度是单个细胞恢复并实际生长成可行的殖民地的能力。由于克隆的缺点差,许多最好的克隆都可以在单个细胞层面丢失。Solentim的优化研究表明,宿主细胞,表达细胞系和不同池的地平线和Sigma细胞系具有良好的恢复和增长。在我们最近的一些客户包括Celgene(包括Celgene),此数据进一步验证网络研讨会

您在哪里看到未来的细胞系列发展?

Solentim正在扩大其能力在近期提供客户完整的A-Z全体方法。这将包括仪器,试剂和报告全部细胞系开发过程,删除客户的需求,独立地确定构建细胞系开发实验室所需的哪些元素。另一个不断增长的区域是基因治疗和病毒载体的产生。在这方面有很多公司进行临床试验,需要从瞬态到稳定的细胞系生产。他们将需要类似的设置,具有单细胞分离,克隆性和克隆遗传的保证。

要了解有关Solentim的更多信息,请访问www.solentim.com.。请按照链接有关贵宾的更多详细信息

关于受访者:

伊恩泰勒博士,Solentim首席商务官

泰勒博士在生物化学中有博士学位。他在小说高价值生命仪器概念和商业化方面有超过25年的工作。在加入Solentim 9年前成立之前,Taylor博士是Genetix PLC的商业总监,他负责克隆百分比的开发和销售选择和隔离高价值MAB生产克隆和一系列其他产品细胞培养。在此之前,泰勒博士是PerkinElmer Life Sciences的高级领导团队的一部分。

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