细胞系发展的新技术和趋势

在上个月召开的Informa Cell Line Development and Engineering会议上,众多制药公司和解决方案提供商分享了Cell Line Development的最佳实践、创新解决方案和新兴趋势。

我很高兴参加会议并希望分享一些亮点。

克隆性

Clonity的主题仍然是一个热门话题,并为几个有趣的讨论提供了起点。虽然FDA今年没有演示文稿,但大部分会谈从监管要求转移到公司如何最好地确保在新的细胞系或遗留细胞系中的地址克隆中的克隆性。介绍了许多案例研究,它呈现了公司如何在日常管理这一点的现实生活中的例子,这些思想尤其启发。还包括来自制药公司和新型单细胞隔离技术的制药公司和供应商的演示文稿。这些谈判主要集中在选择与克隆性联合的表达,加上低媒体的恢复。一些制造商继续专注于传统技术,如电镀成半固体介质;并在静态相位下测定克隆的蛋白质滴度。我们发现这种方法有趣,因为许多细胞系开发组已经出于各种原因离开这些方法。有些指出,半固体介质选择某些小区属性,并且静态阶段的TITRE与FED批次不相关。其中一些新颖的方法可以为潜在的更高的生产者提供富集,但是通过FACS或Vector优化的同样预先选择可以达到相同的结果。

在两个演示文稿中讨论了使用下一代测序(NGS)来证明传统生产细胞系克隆性的新技术。他们讨论了使用全基因组NGS来通过映射转基因整合位点来改善克隆选择。该过程还考虑了转基因拷贝数,不同的集成点,用于克隆适应性的基因组突变,以及可能的转基因突变。虽然这种方法非常适合确定克隆事实,但似乎有一种共识,即这可以是相当劳动密集型的,因此确保克隆内部可能是公司去的更简单的方式。

内包和外包

另一个讨论主题是在源代码或外源细胞系列开发。有一个演示文稿,专注于为什么“源性”在处理复杂分子时为小型生物技术开发的“源于采购”更为富有成效;围绕重组蛋白如免疫细胞因子(与细胞因子连接的抗体)产生的挑战。

工程增加慢病毒矢量生产

第一天的最后一个,但可能是最有趣的讨论,解释了编辑HEK 293T细胞系产生慢病毒载体的挑战。我们也听说了它们越来越多的应用,比如CAR-T治疗。葛兰素史克公司的Conrad Vink向我们展示了传统的转染含有单个病毒成分的几个质粒的方法如何只导致瞬时表达。正因为如此,他们的努力集中在开发一种方法来制造单个质粒(包含制造病毒载体所需的所有成分)并将其转染到细胞中。使用这种方法,他们可以进行选择和诱导,产生一个稳定的包装细胞系,将产生病毒载体。在需要的时候,转基因可以被转染。这是非常令人兴奋的进展lentirviral生产的稳定细胞系生成在这个过程中更容易编辑为未来的目标,希望使整个流程更快的病人治疗和使临床试验所需的大量的材料更容易制造和成本有效。

细胞系发育中的合成生物学

会议第二天的几个演讲描述了合成生物学的使用,以帮助了解细胞系发展中的成功和失败。来自谢菲尔德大学的大卫詹姆斯教授讨论了为什么公司应该从盲目细胞线开发改变他们的重点 - 没有真正了解细胞发生的事情 - 引进遗传分析和合成生物学技术。根据大卫的说法,这将有助于我们对细胞系发展成功的更大了解。他还强调了设计如何被视为“高端”的细胞系发展,以减少未知的未知和“曲调细胞工厂的任何蛋白质”。

来自辉瑞的林张通过概述使用重组酶介导的盒式(RMCE)来回应David的视图,通过使用重组酶介导的盒式交换(RMCE)来切换与它们想要整合的单克隆抗体(MAB)的“着陆垫”。它们使用CRIPSR与“登陆垫”生成细胞系,这可以很容易地切换,确保集成站点保持不变并且不再随机。实际上,着陆垫意味着他们可以减少要筛选的克隆数量,并且影响是一个人现在可以做3个项目而不是一个项目。

与上述主题一致,诺华的Holger Laux解释了他们如何使用转录组学和工程技术来增加重组抗体的表达。作为一个例子,他们确定了8号染色体端粒区域的丢失导致了抗体的高表达,所以他们设计了一个去除该区域的细胞系。因此,该细胞系现在容易产生高水平的蛋白质(增加35倍)。这是另一个例子,如何更好地了解细胞的遗传可以帮助生产稳定的细胞系和未来的发展的细胞系。

灌注对FED批量的影响

来自BioCSL的Arna Andrews和来自Vevey的默克公司的一名科学家谈论了灌注与饲料批次相比的趋势。默克公司在早期谈到了灌注细胞培养基中克隆表型的筛选方法。这确实导致了一个反复出现的主题,即在CLD过程的早期阶段筛选最适合预期过程和产品质量的关键质量属性

会议结束后,我对我们行业正在发生的令人振奋的发展重新充满了乐观,并肯定我们公司正在推出和开发的进一步产品将为该领域的科学家做出重大贡献。

我期待着参加Informa的细胞系发展和工程会议下个月在旧金山,如果你也参加了,请在Solentim的展位200号打个招呼


关于作者:


Andrea Gough,产品经理,Solentim.

安德里亚·高夫在2年前加入Solentim,从Thermofisher提供联系产品经理。在此之前,她在Genetix之前,她是克隆百分点和克隆地块成像仪产品线的应用科学家。安德里亚是在英国的全球总部的。

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