如何为我的基因选择最好的质粒?

回答

有两种主要类型的载体,克隆和表达载体。克隆载体是生成许多基因副本的理想选择。如果目标是表达感兴趣的基因,则需要表达载体。

对于克隆载体,关键方面是副本编号(取决于ORI),可选标记和克隆站点。通常,优选高拷贝数。注意,当基因对细胞有毒时,或者当质粒不稳定时,低拷贝数可能有利。可选标记允许鉴定阳性转化体。大多数时间这些都将是耐药标记物,但也使用营养缺血性标记物。检查矢量是否包含适合插入的克隆站点是很重要的。迄今为止,大多数载体含有多个克隆部位,这使得载体可能与所选限制酶兼容。

表达载体含有与表达,例如促进剂,核糖体结合位点,终止剂,标签或融合蛋白相关的一些额外序列。这些序列中的一些是特异于宿主生物。因此,表达载体需要与所选宿主生物相容(例如哺乳动物,昆虫,大肠杆菌)。

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