我们通过使用苯并酶治疗来除去质粒。这是你建议的还是更好的解决方案?

回答

去除DNA是病毒载体制造的关键挑战之一。为了达到<10ng DNA /剂量和DNA尺寸<200bp的调节要求,需要良好的策略。典型的策略由至少三种不同的技术组成:

  • DNA消化,使用内切核酸酶
  • 切向流过滤,以除去碎片的DNA
  • 色谱纯化

目前,苯并酶®内切核酸酶被视为载体处理中DNA消化的行业标准。它是一种有效的内切核酸酶,可以降解所有形式的RNA和DNA(单次和双链)。一个单位的苯并酶®内切核酸酶能够在30分钟内将大约37μg的DNA降低至低至3-8个碱基对。苯并酶®内切核酸酶以三种不同的质量等级提供,以满足尽可能宽的加工和成本要求。例如最高纯度等级是苯并酶®内切核酸酶安全加®专家,它是GMP制造和动物来源的自由。因为它是使者的一部分®计划,它由优质的档案备份,这可以通过监管挑战帮助您快速跟踪。

为了优化苯共酶的使用®内切核酸酶,建议进行小型DOE实验。需要检查的三个参数是浓度,孵育时间和温度。可以找到一个DOE设置的示例这里。还优选检查该过程中的步骤使用苯共酶®内切核酸酶是最佳的,例如,在细胞裂解之前,后细胞裂解或澄清单元后。

使用内切核酸酶消化DNA有几个好处:

  • 限制病毒 - 核酸复合物(由于PI和/或保留时间偏移而纯化不可预测),因此增加产率。
  • 保护下游设备免受DNA污垢
  • 减少粘度

苯酶酶的一般信息®可以找到内切核酸酶这里

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