对生物处理的媒体开发故障排除

我们最近完成了我们的询问专家讨论对生物处理的媒体开发故障排除。本周我们有许多有趣的问题和宝贵的答案和建议。讨论了CHO,MDCK和BHK细胞系,并包括整体主题包括介质配方粉末与液体,稳定性,溶解度,无血清,化学定义和未定定量的组分等介质配方。故障排除提示在蛋白质糖基化,脂肪酸和胆固醇补充剂上,利用代谢特征来改善生产,降低细胞凋亡,增加细胞活力,并处理浪费问题。

这项要求专家会议由GE Healthcare Life Sciences赞助,并由Peggy Lio,Peggy Lio,Procience Science导演,GE Healthcare Life Sciences。Lio女士负责领导美国细胞文化业务的技术应用策略。她从生命技术加入GE,她负责在全球开发PD-Direct BioProcess定制细胞系和细胞文化媒体优化服务计划。她还领导了一个申请团队,负责科学支持新的细胞系和媒体产品以及流程开发。在生命技术之前,PEGGY持有了与Schering-Plow Corp.越来越努力的角色,在那里她最终成为基于生物技术的各种生物技术的哺乳动物和微生物发酵过程开发的责任。PEGGY拥有超过30年的大量技术和商业经验,以及Sechering和Life Technologies的多种荣誉和奖项。

下面是令人恐惧的讨论。有关讨论的完整成绩单,请参阅 -询问专家-Troubleshooting BieProcencessing的媒体开发

您能解释细胞代谢特征如何用于优化CHO细胞中的媒体吗?

答案:
有几种利用细胞代谢特征进行中等优化的方法。首先,通过花介质分析可以容易地确定诸如氨基酸和维生素的关键培养基组分的代谢率。然后,代谢型材可以用于设计化学计量平衡的介质配方。由于代谢特征是动态的,因此利用来自细胞生长阶段和固定生产阶段的代谢率最适合基础和饲料介质的化学计量平衡。其次,细胞代谢是相互关联的网络和代谢特征可以指导中等优化的焦点。一个例子在糖酵解途径和TCA周期内。对于倾向于乳酸产生的细胞系,中等优化可以通过将代谢通量切换到TCA循环来解决该问题。最后,细胞代谢特征也会影响生物质形成和蛋白质产生之间的平衡。对于具有高生长速率但低生产率的细胞系,通过培养基优化限制代谢率可以迫使细胞对蛋白质产生的工作,从而提高产物产量。


什么媒体组分可以降低细胞凋亡并增加超越临界密度的细胞活力?

答案:
细胞凋亡通常由营养耗竭和/或代谢物积累引起。通过适当的饲养策略可以防止营养消耗。代谢物积累在灌注过程中较少,但在美联储批处理过程中往往挑战。控制代谢物积累的培养基优化方法可包括:减少谷氨酰胺以控制氨,减少碳酸氢盐以调节二氧化碳,并使用交替的碳源来控制乳酸水平。此外,还有关于靶向凋亡途径,通过掺入Caspase抑制剂或沉默RNA的化学品。但是,这些方法尚未纳入工业过程中。


培养基组成和蛋白质糖基化学之间是否已知相关性?

答案:
通过不同的机制,存在已知用于抗蛋白质糖基化的培养基组分。例如,锰用作糖基化途径中的辅因子,可以改善糖基化;半乳糖会影响聚糖前体,并可以改善糖基化;在培养基配方中的高谷氨酰胺可引起由于氨产生而导致较少的糖基化。

把它固定在pinterest上